featurecount给出零计数

时间:2019-02-08 12:16:57

标签: count rna-seq

我是生物信息学的年轻研究员。我鉴定了一些lincRNA,现在我想进行差异基因表达,因为我将个别条件特异的原始读物与这些鉴定的lincRNA对齐,如下所示:

  

SL3.0ch00:1230877-1231088   GCCTATATATAGAGTACTAAATTCCTTAAAAAGGCATCTCGGAAGTTCCATAAATAGATCAAGATATCGAATAAACTAACGACCCTCGAATCATACAAAATCATGGAGAGTAGAATTAAGGGATCAATAGAATTGTACCGCTG

因为它是基因间的,所以我必须创建自己的gtf文件,如下所示:

 SL3.0ch00       myIntergenic    intergenic      1230877 1231088 .       +       .       gene_id "xxx"; transcript_id "SL3.0ch00:1230877-1231088";
SL3.0ch00       myIntergenic    intergenic      1147815 1150318 .       +       .       gene_id "xxx"; transcript_id "SL3.0ch00:1147815-1150318";

,然后通过以下命令运行featureCount:

featureCounts -T 60 -F GTF -a a.gtf -o counts1.bed accepted_hits.bam

这使所有读取都为零。

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